Анотація до роботи:

Шепель О.А. Вплив цитокінів на мейотичне дозрівання ооцитів мишей. – Рукопис.

Дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата біологічних наук за спеціальністю 03.00.13 – фізіологія людини і тварин. – Інститут фізіології ім. О.О. Богомольця НАН України, Київ, 2008 р.

Встановлено, що ФНП-, ІЛ-2 та ІФН- in vitro дозозалежно пригнічували мейотичне дозрівання ооцитів, ізольованих від кумулюсних клітин. Вплив цитокінів на ооцити, культивовані в складі кумулюсно-ооцитарних клітинних комплексів, був менш вираженим. Виявлено пошкоджуючу дію ФНП-, ІЛ-2 та ІФН- на життєздатність клітин фолікулярного оточення ооцитів. Установлено, що одним із механізмів супресивного впливу цитокінів на дозрівання ооцитів є порушення функціонування мітохондрій, що супроводжується пошкодженням іонотранспортних систем. Показано, що ІЛ-2 та ФНП- пригнічували мейотичне дозрівання ооцитів в умовах імунного пошкодження яєчників великими дозами антиоваріальних антитіл. Проте в присутності ІФН- спостерігалось стимулювання ооцитогенезу, що має важливе значення для обґрунтування доцільності використання препаратів ІФН при лікуванні безпліддя у хворих із аутоімунними процесами яєчників. Застосування ін’єкцій малої дози антитіл знижувало пригнічуючий вплив ІФН-, ІЛ-2 та ФНП- на мейотичне дозрівання ооцитів. Такі результати дозволяють стверджувати, що антиоваріальні антитіла в малих дозах здійснюють протективний ефект на ооцитогенез при патологічному впливі даних цитокінів.

Встановлено, що цитокіни – ІФН-, ІЛ-2 та ФНП- – мають супресивний вплив на дозрівання ооцитів у нормі та при дії великих і малих доз антиоваріальних антитіл, визначено механізми впливу цитокінів на відновлення процесу мейозу та формування першого полярного тільця ооцитами, що є абсолютно необхідним для нормального запліднення і подальшого розвитку плода.

1. Прозапальні цитокіни – ФНП- і ІЛ-2, а також ІФН- пригнічували мейотичне дозрівання ооцитів, відокремлених від кумулюсних клітин, що підтверджується зменшенням кількості ооцитів, які відновили мейоз та сформували перше полярне тільце. Вплив цитокінів на ооцити, культивовані в складі кумулюсно-ооцитарних клітинних комплексів, був менш вираженим.

2. ФНП- і ІЛ-2, а також ІФН- мають пошкоджуючу дію на життєздатність фолікулярного оточення ооцитів, що підтверджується суттєвим зниженням кількості живих клітин і зростанням кількості клітин, що піддаються апоптозу. У випадку дії ФНП- активуєтся також і некротична загибель фолікулярних клітин.

3. Досліджувані цитокіни викликають пригнічення мейотичного дозрівання ооцитів через порушення функціонального стану мітохондрій (ІЛ-2 блокує кальцієвий уніпортер, ІФН- виявляє протилежну по відношенню до ІЛ-2 дію, а ФНП- сприяє відкриттю мітохондріальних пор), що встановлено шляхом фармакологічного впливу на ооцити даних цитокінів у комбінації з рутенієм червоним, амінооксиацетатною кислотою та циклоспорином А.

4. За умов імунного пошкодження яєчників за допомогою великої дози антиоваріальних антитіл у присутності ФНП- та ІЛ-2 відбувалося пригнічення мейотичного дозрівання ооцитів. Під впливом ІФН- відсоток ооцитів, що досягли стадії метафази І і ІІ суттєво зростав.

5. Вплив ФНП-, ІЛ-2, ІФН- та великої дози гама-глобулінової фракції антиоваріальної цитотоксичної сироватки в дослідах in vitro викликають пригнічення мейотичного дозрівання ооцитів мишей.

6. За умов дії малої дози антиоваріальних антитіл пригнічуючий вплив ІФН-a, ІЛ-2 та ФНП-a на розвиток статевих гамет послаблюється, відповідно кількість ооцитів, що відновили мейоз і сформували перше полярне тільце, зростає і наближається до їх значення в контролі.

Публікації автора:

Статті:

1. Янчій Р.І., Вознесенська Т.Ю., Зюбіна О.А. (Шепель О.А.). Вплив альфа інтерферону на відновлення мейотичного дозрівання ооцитами мишей in vitro // Наук. записки Терноп. нац. пед. ун-ту імені Володимира Гнатюка. Серія: Біологія. – 2005. – № 1-2 (25). – С. 85-89. (Здобувач самостійно провела всі дослідження та статистичну обробку даних, узяла участь у написанні статті).

2. Вознесенская Т.Ю., Блашкив Т.В., Зюбина Е.А. (Шепель Е.А.), Янчий Р.И. Влияние ингибиторов митохондриальных переносчиков на мейотическое созревание ооцитов мышей // Вісн. Черкаськ. ун-ту. Серія: Біол. науки. – 2006. – № 91. – С. 16-25. (Здобувач брала участь у проведенні дослідження та написанні статті).

3. Янчій Р.І., Вознесенська Т.Ю., Шепель О.А., Блашків Т.В., Бідзіля Ю.П. Цитокіни – як чинники впливу на репродуктивну систему // Наук. записки Терноп. нац. пед. ун-ту імені Володимира Гнатюка. Серія: Біологія. – 2007. – № 1 (31). – С. 89-95. (Здобувач брала участь у проведенні досліджень, аналізі даних та написанні статті).

4. Янчій Р.І., Вознесенська Т.Ю., Шепель О.А. Цитокіни та їх роль в репродуктивній системі // Фізіол. журн. – 2007. – Т. 53, № 3. – С. 82-90. (Здобувач провела аналіз літературних даних, взяла участь у написанні статті).

5. Вознесенская Т.Ю., Блашкив Т.В., Шепель Е.А., Янчий Р.И. Влияние ингибитора малат-аспартатных митохондриальных переносчиков на клеточный апоптоз фолликулярного окружения ооцитов при моделировании иммунной патологии яичников у мышей // Зб. наук. праць співробітників КМАПО імені П.Л. Шупика. – К., 2007. – Вип. 16, кн. 2. – С. 583-590. (Здобувач брала участь у проведенні досліджень, опрацюванні даних та написанні статті).

6. Шепель О.А., Янчій Р.І. Реактивуюча дія малої дози антиоваріальних антитіл на мейотичне дозрівання ооцитів мишей за умов пригнічуючого впливу інтерлейкіну-2 та фактору некрозу пухлини- // Актуальні питання фармацевтичної та медичної науки та практики: Зб. наук. статей. Том 2, вип. XIX. – Запоріжжя: Вид-во Запорізьк. держ. мед. ун-ту, 2007. – С. 245-251. (Здобувач самостійно провела дослідження, статистичну обробку даних, взяла участь у написанні статті).

Тези доповідей:

1. Янчій Р.І., Зюбіна О.А. (Шепель О.А). Пригнічувальна дія альфа інтерферону на відновлення першого поділу мейозу ооцитами мишей in vitro // Матеріали XVII з'їзду Укр. фізіол. то-ва з міжнар. участю (м. Чернівці, 18–20 травня 2006 р.) // Фізіол. журн. – 2006. – Т. 52, № 2. – С. 116-117.

2. Zjubina O.A. (Shepel O.A), Blashkiv T.V., Voznesenskaya T.Yu., Yanchiy R.I. The influence of the mitochondrial carriers inhibitors on murine oocyte meiotic maturation in the cumulus-oocyte-cellular complexes // Молодь та поступ біології: Матеріали ІІ міжнар. наук. конф. студентів та аспірантів (м. Львів, 21–24 березня 2006 р.). – Львів, 2006. – С. 451-452.

3. Шепель Е.А. Влияние ингибиторов митохондриальных переносчиков на мейотическое созревание ооцитов мышей разного возраста // Матеріали VIII наук. конф. молодих учених з міжнар. участю "Біологічні основи розвитку патології пізнього віку" (м. Київ, 29 січня 2007 р.). – К.: Ін-т геронтології АМН України, 2007. – С. 154-155.

4. Shepel O.A., Voznesenskaya T.Yu., Yanchiy R.I. Meiotic maturation of murine oocytes in conditions of action of interferon-alpha and a small dose of antiovarian antibodies // Матеріали ІІІ міжнар. конф. молодих учених "Розмаїття живого. Екологія. Адаптація. Еволюція" (м. Одеса, 15–18 травня 2007 р.). – Одеса, 2007. – С. 136-137.

5. Шепель О.А., Вознесенська Т.Ю., Янчій Р.І. Вплив інтерлейкіну-2 на мейотичне дозрівання ооцитів мишей // Молодь та поступ біології: Матеріали ІІІ міжнар. наук. конф. студентів та аспірантів (м. Львів, 23–27 квітня 2007 р.). – Львів, 2007. – С. 493.

6. Янчій Р.І., Бідзіля Ю.П., Шепель О.А. Модулюючий вплив інтерлейкіну-2 на скоротливу активність гладеньких м'язів матки та оогенез ссавців // VI читання В.В. Підвисоцького: Бюл. матер. наук. конф. (м. Одеса, 31 травня – 1 червня 2007 р.). – Одеса: Одеськ. держ. мед. ун-т, 2007. – С. 130.

7. Шепель О.А., Сердюк О.М. Вплив цитокінів на мейотичне дозрівання ооцитів мишей в умовах експериментального імунного пошкодження яєчників ксеногенними антиоваріальними антитілами // Шевченківська весна: Матеріали VI міжнар. наук.-практ. конф. студентів, аспірантів та молодих учених (м. Київ, 20–23 березня 2008 р.). – К.: Обрії, 2008. – Т. 2, вип. VI. – С. 114-115.

8. Шепель О.А. Вплив цитокінів на мейотичне дозрівання ооцитів мишей при модуляції функціонального стану мітохондрій // Шевченківська весна: Матеріали VI міжнар. наук.-практ. конф. студентів, аспірантів та молодих учених (м. Київ, 20–23 березня 2008 р.). – Стрий: Укрпол, 2008. – Т. 3, вип. VI. – С. 10-11.