Анотація до роботи:

Благодаренко Е.А. Роль опіоідів і внутрішньониркових гормональних систем у тригерних механізмах апоптозу за гіпертрофії однієї нирки. – Рукопис.

Дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата медичних наук за спеціальністю 03.00.04 – біохімія. – Інститут геронтології Академії Медичних Наук України, Київ, 2003 р.

Дисертація присвячена вивченню ролі опіоідів (на прикладі синтетичного лей-енкефаліну даларгіну) і системи простаноідів у регуляції активності сигнальних шляхів апоптозу (сфінгомієлінового, NO-залежного, кальцій-залежного і механізмів регуляції об’єму клітин) за гіпертрофії однієї нирки. Виявлено підвищення рівня фрагментації ДНК у тканині нирки, що гіпертрофується. Це вказує на активацію апоптозу в умовах посиленої проліферації. При цьому відбувалося підвищення вмісту сфінгозина і метаболітів оксиду азоту в тканині нирки й іонів кальцію, тобто ці сигнальні шляхи були задіяні в активації апоптозу в умовах гіпертрофії однієї нирки. В загальній сумі метаболітів оксиду азоту значно падала частка нітритів, що вказує на посилення продукції АФК. Також спостерігається збільшення об’єму клітин ниркової тканини. Це сприяє активації продукції АФК у клітках. Змінюється активность системи простаноідів у нирковій тканині: підвищується продукція ПГЕ2 у корі нирки і збільшення продукції ПГF2a (у медулі і корі). Це вказує на участь простаноідів в адаптаційно-компенсаторних процесах у однієй нирці й участь їх у регуляції активності проліферації й апоптозу. Виявлене модулюючий вплив даларгіну (синтетичного лей-енкефаліна) на розвиток апоптозу: активація фрагментації ДНК у інтактних щурів, і зниження підвищеного рівня, наближення його до норми в умовах гіпертрофії і гіперфункції. Даларгін знижував вміст оксиду азоту і кальцію в тканині нирок.

1. Гіпертрофія однієї нирки щурів після однобічної нефректомії супроводжується активацією апоптозу в тканині нирки, що виражається в збільшенні ДНК-фрагментації в нирковій тканині однієї нирки у експериментальних тварин. Пік цієї активації спостерігався на 7 добу після нефректомії.

2. Вміст вільного сфінгозину в тканині однієї нирки підвищується відповідно з ростом ДНК-фрагментації, досягаючи максимальної концентрації на 7-у добу, що відбиває індуктивну роль сфінгозина в стимуляції апоптозу за умов гіпертрофії.

3. Рівень оксиду азоту в тканині однієї нирки значно підвищувався, більш ніж у два рази на 3-у і 7-у добу. На 14-у добу - знижувався, але залишався підвищеним у порівнянні з контролем. При цьому спостерігалося значиме зменшення частки NO₂ у загальній кількості оксиду азоту (сума NO₂ і NO₃) в усі терміни післяопераційного періоду з піком зниження на 7-у добу.

4. Встановлено зниження біосинтезу і екскреції ниркових простаноідів в молодих і підвищення у дорослих тварин у післяопераційний термін. Зміна біосинтезу ниркових простаноїдів впливає на функціональну адаптацію однієї нирки. Наявність позитивного кореляційного зв'язку між зміною рівня біосинтезу ПГF₂ і рівнем фрагментації ДНК підтверджує участь цього простаноіда в активації апоптозу в тканині нирки в процесі гіпертрофії.

5. Ефект даларгіну (синтетичного лей-енкефаліну) на частоту апоптозу в нирковій тканині залежить від фізіологічного стану тварини. У інтактних тварин внутрішньочеревинне введення даларгіну в дозі 100 мкг/кг у добу протягом 7 днів викликало збільшення ДНК-фрагментації в нирковій тканині в 2,5 рази. А в умовах гіпертрофії однієї нирки даларгін пригнічував активність апоптозу на всі терміни після операції, наближаючи до контрольних значень.

6. В обох варіантах ефекту даларгіну на апоптозу, відбувається зміна вмісту стабільних метаболітів NO в тканині нирки, об’єму клітин, а також рівня біосинтезу ПГЕ2 як у медуллі, так і в корі нирки. Також даларгин, активуючи апоптозу в тканині нирки, зменшував частку NO₂^- у загальному вмісті метаболітів NO, а за пригнічення апоптозу, підвищував частку NO₂^-.

7. Різний ефект даларгіну на частоту апоптозу пов'язаний зі зниженням рівня кальцію і оксиду азоту у тканині нирці. В інтактній тканині даларгін знижував рівень кальцію і концентрацію оксиду азоту, а в умовах гіпертрофії однієї нирки наближав ці значення до рівня контрольної групи.

8. Введення даларгіну інтактним щурам на протязі 7 діб призводило до збільшення спин-решеточного (Т1), спин-спінового (Т2) часів релаксації протонів тканинної води і частки внутрішньоклітинної води (Ра) нирки, що вказує на збільшення об’єму клітин за рахунок фракції вільної води. Збільшення об’єму клітин збігається з посиленням фрагментації ДНК. В умовах гіпертрофії однієї нирки під дією даларгіну спостерігалася динаміка до зменшення зазначених показників на фоні зниження ДНК-фрагментації.

Публікації автора:

1. Благодаренко Е.А., Комаревцев В.Н., Фильчуков А.А., Комаревцева Е.В., Жовнер В.А., Попова Е.И. Влияние односторонней нефрэктомии на показатели ¹Н-ЯМР-релаксации протонов тканевой воды крови в онтогенезе // Український медичний альманах.-1999.-Т.2 -№3.-С.24-25

2. Благодаренко Е.А., Комаревцев В.Н. Влияние опиоидов на ¹Н-протонные механизмы регуляции клеточного объема при гипертрофии единственной почки // Український медичний альманах.-2000.-Т.3 -№4.-С.26-28

3. Благодаренко Е.А. Онтогенетические особенности показателей водно-электролитного обмена у крыс после односторонней нефрэктомии // Актуальні проблеми акушерства і гінекології, клінічної імунології та медичної генетики.-2001.-№6.-С.227-231

4. Орлова Е.А., Благодаренко Е.А., Фильчуков Д.А., Методика определения сфингомиелина в почечной ткани // Український медичний альманах.-2001.-Т.4 -№6.-С.120-123

5. Благодаренко Е.А. Влияние даларгина на NO-зависимый механизм активации апоптоза // Український медичний альманах.-2002.-Т.5 -№3.-С.13-15

6. Комарєвцева І.О., Орлова О.А., Благодаренко Є.А. Вміст оксиду азоту в тканинах нирок при активації апоптозу // Український біохімічний журнал.-2002.-Т.74.-№4-С.104-107

7. Blagodarenko E., Filchukov A., Komarevtsev V.N., Savenko D.V. Influence of dalargin on the mechanisms of regulation of apoptosis // 5^th International Medical Students congress: April 12-14, 2000 Katowice, Poland, Congress book.-P.65

8. Комарєвцева І.О., Орлова О.А., Комарєвцев В.М., Благодаренко Є.А. Вивчення ролі сфінгомієлінового сигнального шляху активації в тканині нирок // Фізіологічний журнал.-2002.-Т.48.-№2.-С.7

9. Благодаренко Є.А., Белкіна Г.А., Соловйова І.В., Корявий Н.В., Фурсіна Ю.О. Вплив даларгіну на триггерні механізми апоптозу при гіпертрофії єдиної нирки після односторонної нефректомії // ІХ Конгресс Світової Федерації Українських Лікарських Товариств Серпень 19-23, 2002 Луганськ. Тези доповідей.-С.215

10. Комаревцева И.А., Орлова Е.А., Благодаренко Е.А. Бифункциональный характер действия оксида азота в ткани почек крыс при активации апоптоза // Український біохімічний журнал.-2002.-Т.74.-№4а (додаток 1)-С.47