Анотація до роботи:

Лук'янець О.О. Роль кальцієвих каналів у функціонуванні нервових та нейроендокринних клітин в нормі та патології. – Рукопис.

Дисертація на здобуття наукового ступеня доктора біологічних наук за спеціальністю 03.00.02 – біофізика. Інститут фізіології ім. О.О.Богомольця НАН України, Київ, 2005.

Дисертація присвячена дослідженню ролі Ca²⁺ каналів у функціонуванні нервових та нейроендокринних клітин в нормі та патології. У роботі були досліджені біофізичні та фармакологічні властивості Ca²⁺ потенціалозалежних каналів їх експресія в процесі клітинної диференціації. Особлива увага була приділена особливостям регуляції Ca²⁺ каналів шляхом їх фосфорилування та дефосфорилування. З одного боку, було досліджено механізм збільшення Ca²⁺ макроструму викликаного фосфорилуванням каналів. З іншого - вивчення дефосфорилування Ca²⁺ каналів за участю Ca²⁺-залежної протеїнфосфатази кальцинейрину (РР2В) показало, значне пригнічення їх функції Ca²⁺-залежним дефосфорилуванням. Дослідження ролі Ca²⁺ каналів в регуляції процесу вивільнення нейротрансмітерів (екзоцитозі) показало, що екзоцитоз не залежить від типу Ca²⁺ каналів через який Ca²⁺ входить в клітину і визначається загальною кількістю Ca²⁺ що входить і від базального [Ca²⁺]_i передуючому стимулу. Був запропонований везикулярний механізм, що описує експериментальну двоступеневу залежність екзоцитозу від [Ca²⁺]_i. Експерименти присвячені ролі Ca²⁺ каналів в розвитку паталогічних станів ЦНС – гіпоксії/ішемії та епілепсії на модельних системах нейронів щурів показали, що гіпоксія викликає істотне підвищення [Ca²⁺]_i. Отримані дані дозволяють припустити, що Ca²⁺ канали можуть бути початковими структурами чутливими до гіпоксичної дії, зміни активності яких вторинно викликають інші порушення. Наші дослідження ролі Ca²⁺ каналів в розвитку епілепсії шляхом вивчення механізмів дії відомого анти-епілептичного препарату левотерацитаму (LEV) показали, що LEV селективно та не зворотно пригнічував HVA Ca²⁺ струм N-типу, та дозволили припустити існування підтипу N-типів Ca²⁺ каналів, чутливих до LEV, які можуть бути залучені в молекулярну основу його антиепілептичноі дії. Зроблено висновок, що Ca²⁺ канали відіграють суттєву роль в фуекціюванні нервових та нейроендокринних клітин в нормі та патології.

Ключові слова: амперометрія, дефосфорилування, гіпоксія, епілепсія, екзацитоз, кальцієві канали, кальцієва сигналізація, кальцинейрин, секреторні везикули, трансфекція, фосфорилування.

1. У дисертаційній роботі наведені дослідження потенціалокерованих Ca²⁺ каналів, пов''язані з регуляцією, функцією та роллю в патологічних станах нервової системи, які вивчалися за допомогою ряду електрофізіологічних, мікрофлуоресцентних, імуноцитохімічних, молекулярнобіологічних та інших методів.

2. За допомогою реєстрації активності поодиноких Ca²⁺ каналів встановлено, що РК-А-залежне фосфорилування Ca²⁺ каналів, котре викликає збільшення Ca²⁺ макроструму, змінює кінетику поодиноких каналів, збільшує число активних каналів і вірогідність їх знаходження у відкритому стані. В той же час фосфорилування не впливає на провідність поодинокого каналу .

3. За допомогою імуноцитохімічних досліджень, встановлено, що Ca²⁺-залежна фосфатаза кальцинейрин у великій кількості експресується в DRG нейронах, де він локалізований переважно біля внутрішньої поверхні плазматичної мембрани і його локалізація співпадає з локалізацією b-субодиниці Ca²⁺ каналів. Це може свідчити про те, що функція кальцинейрину мабуть безпосередньо пов’язана з активністю потенціалокерованих Ca²⁺ каналів.

4. Досліджено взаємодію між кальцинейрином (PP2B) і Ca²⁺ каналами в NG108-15 клітинах, які оверекспресують PP2B, і встановили, що в таких клітинах сумарні високопорогові Ca²⁺ струми пригнічуються майже на 60% по відношенню до контролю. Внутрішньоклітинне додавання блокаторів кальцинейрину індукувало 5-ти разове збільшення амплітуди цих Ca²⁺ каналів, що свідчить, що активність PP2B не впливає на експресію каналів, але модулює їх функцію Ca²⁺-залежним дефосфорилуванням каналів, котрі знаходяться в фосфорильованому стані, і що РР2В, головним чином, впливає на активність N-типу Ca²⁺ каналів в NG108-15 клітинах.

5. Досліджено роль різних типів Ca²⁺ каналів у секреції (екзоцитозі) катехоламінів в хромафінних клітинах і встановлено, що секреція, виміряна змінами ємності мембрани, переважно визначається загальним кумулятивним зарядом Ca²⁺ струму і базальним рівнем [Ca²⁺]_i, котрий передує стимулу і не залежить від типу Ca²⁺ каналів.

6. Встановдено, що викликаний деполяризацією екзоцитоз проходить через два ступені, обидва з яких лінійно залежать від [Ca²⁺]_i і від порогової «критичної» концентрації Ca²⁺ (200 300 nM). Запропоновано везикулярний механізм, що описує двоступеневу залежність екзоцитозу від внутрішньоклітинного Ca²⁺ ([Ca²⁺]_i). Згідно моделі, при рівні [Ca²⁺]_i, нижчому порогової точки, везикули малого розміру зливаються з плазматичною мембраною, тоді як при вищому, починають зливатися з мембраною і везикули більшого розміру.

7. Зроблено морфологічний аналіз та досліджено склад везикул в хромафінних клітинах. Встановлено, що в цих клітинах існує велика кількість везикул, які відрізняються за своєю морфологією та функцією. Показано, що при деполяризації хромафінних клітин деполяризацією, підвищенням внутрішнього Ca²⁺ або агоністом ацетилхолінових рецепторів у секреції приймають участь два типи везикул, малі або середні електронно-щільні та синаптично-подібні світлі, які залучені у процес екзоцитозу різними механізмами – темні везикули шляхом повного злиття з мембраною, тоді як світлі – через формування ніжки та тимчасового злиття.

8. За допомогою флуоресцентного методу з використанням зонду Fura-2 показано, що зменшення парціального тиску кисню до 2535 мм рт.ст. у зовнішньоклітинному середовищі ізольованих сенсорних нейронів щурів спричиняє збільшення внутрішньоклітинної концентрації вільних іонів кальцію на 120 % і основним шляхом цього збільшення є потенціалокеровані кальцієві канали L-типу в DRG нейронах.

9. Досліджено роль Ca²⁺ каналів в перебігу гіпоксичного ефекту в нейронах гіпокампу. Встановлено, що помірна гіпоксія (20-30 mm Hg) спричиняє подвійну дію на Ca²⁺ канали – з одного боку, вона викликає внутрішньоклітинно опосередкований приріст кальцієвого входу через Ca²⁺ канали, і з другого боку - їх Ca²⁺ -залежну інактивацію.

10. Встановлено, що зниження pO₂ до 1530 mm Hg індукує потенціацію HVA Ca²⁺ струму на 94% в нейронах гіпокампу. Використання селективних блокаторів Ca²⁺ каналів показало, що блокування каналів L-типу зменшує гіпоксичний ефект на 54%, тоді як блокатор N-типу на 30%. Враховуючи співвідношення струмів, що створюються підтипами Ca²⁺ каналів в цих клітинах, знайдено, що обидва типи HVA Ca²⁺ каналів чутливі до гіпоксії, проте L-тип майже в 3.5 разів більш чутливий до зниження рівню кисню.

11. Вперше встановлено, що антиепілептична сполука леветірацетам селективно блокує N-тип Ca²⁺ каналів в нейронах гіпокампу, що може лежати в основі її анти-епілептичної дії.

12. Зроблено висновок щодо ролі і принципів регуляції активності Ca²⁺ каналів, як однієї з основних функцій нейронів і ендокринних клітин, а також основних причин патологічних станів мозку (ішемії/гіпоксії та епілепсії), а також особливостей фармакологічного впливу на такого роду зміни, що складає основу для вивчення можливостей корекції ряду клінічних захворювань.

Публікації автора:

1. Kostyuk P.G., Lukyanetz E.A. Intracellular mechanisms of calcium channel modulation by serotonin in identified Helix Pomatia neurones // Netherlands Journal of Zoology, 1994, 44, 513-523.

2. Lukyanetz E.A., Kostyuk P.G. Two distinct receptors operate the cAMP cascade to up-regulate L-type Ca channels // Pflgers Arch. 1996, 432, P 174-181.

3. Lukyanetz E.A., Sotkis A.V. Serotonin-induced changes in the activity of single Ca²⁺ channels in Helix pomatia neurones. Neurophysiology (Kiev), 1996, 28, N2/3, 132-140.

4. Lukyanetz E.A., Sotkis A.V. Characterization of single K⁺ channels in Helix pomatia neurones. Neurophysiology (Kiev), 1996, 28, N6, 250-259.

5. Lukyanetz E.A. Evidence for colocalization of calcineurin and calcium channels in dorsal root ganglion neurones. 1997, Neuroscience, 78, N3, 625-628.

6. Lukyanetz E.A. Development of view about the voltage-operated calcium channels of membrane. 1997, Neurophysiology (Kiev), 29, N1, p.56-69.

7. Lukyanetz E.A., Sotkis A.V. The investigation of modulating mechanism of calcium and potassium channels by serotonine in Helix pomatia neurons., 1997, Fiziologicheskii zhurnal, (Kiev) 44, N5/6, p.100-107.

8. Yavorsky V.A., Lukyanetz E.A. Pilocarpine-induced epileptoform activity of isolated CA1 hippocampal neurones. 1997, Neurophysiology (Kiev), 29, N3, p.205-2*Lukyanetz E.A. Role of calcineurin in regulation of high voltage-activated calcium channel activity. 1997, Neurophysiology (Kiev), 29, No 6, 442-447.

9. Lukyanetz E.A. Calcium channel activity in NG108-15 cells overexpressing protein phosphatase-2B. 1997, Neurophysiology (Kiev), 29, No4/5, 330-333.

10. Sotkis A.V., Kostyuk P.G., Lukyanetz E.A. Diversity of single potassium channels in isolated snail neurones. 1998, NeuroReport, 9, N 7 p.1413-1417.

11. Lukyanetz E.A. Diversity and properties of Ca channel types in NG108-15 cells. 1998, Neuroscience, Vol. 87, Issue 1, pp. 265-274.

12. Lukyanetz E.A., Piper T., Sihra T.S. Calcineurin involvement in the regulation of high-threshold Ca²⁺ channels in NG108-15 (rodent neuroblastoma x glioma hybrid) cells. 1998, J.Physiology, 510 (2), pp 371-385

13. Shkryl V.M., Lukyanetz E.A. Properties of oxygen-sensitive electrods using in patch-clamp experiments on nerve cells. Neurophysiology, 1998, 30, 4/5, 279-283.

14. Pochynyuk O.M., Zaika O.L., Lukyanetz E.A. Determination of the released neurotransmitter type by using carbon fiber amperometry. Neurophysiology, 1998, 30, 4/5, 284-287.

15. Konovalov A.A., Lukyanetz E.A. Activity of sodium voltage-operated currents of cortical neurones during hypoxia. Neurophysiology, 1998, 30, 4/5, 312-315.

16. Lukyanetz E.A., Neher E. Different types of calcium channels and secretion from bovine chromaffin cells. 1999. Eur.J.Neurosci., 11 (8) 2865-2873

17. Shkryl V.M, Nikolaenko L.M., Kostyuk P.G., Lukyanetz E.A. High-threshold calcium channel activity in rat hippocampal neurones during hypoxia. Brain Res., 1999, 833/2, p. 319-328.

18. Lukyanetz E.A., Yavorsky V.A. 1999, Investigation of pilocarpine action on properties of accommodation in isolated phasic neurones of rat hippocampus. Fiziol Zh. 45, 4, p.35-40.

19. Lukyanetz E.A., Yavorsky V.A., Kostyuk P.G. Electrical properties of tonic hippocampal neurones can underlie epileptogenesis in brain. 2000. Fiziol Zh. 46(2), p.141-142.

20. Yavorsky V.A., Lukyanetz E.A. 2000. Influence of Li⁺ ions on properties of accommodation in CA1 hippocampal neurones. Neurophysiology (Kiev). 32 (3), 256-258.

21. Zaika O.L., Pochynyuk O.M., Lukyanetz E.A. 2000. Comparative characteristics of secretory responses of chromaffin cells and pheochromocytoma cells (PC12) during their activation by acetylcholine. Neurophysiology (Kiev). 32 (3), 215-217.

22. Koval L.M., Yavorskaya E.N., Tokar S.L, Lukyanetz E.A. 2000. Ultrastructural properties of steroid vesicles and mitochondria in bovine adrenocortical cells. Neurophysiology (Kiev). 32 (3), 272-274.

23. Lukyanetz E.A. 2001. Intracellular events during depolarization-induced exocytosis in chromaffin cells. In: Calcium Signalling, Morad M., Kostyuk P. eds. NATO Science Series, Series I: Life and Behavioural Sciences. V.331, IOS Press Ohmsha, Amsterdam, The Netherlands. p. 174-182.

24. Koval L.M., Yavorskaya E.N., Lukyanetz E.A. 2001. Electron microscopic evidence for multiple types of secretory vesicles in bovine chromaffin cells. General. Compar. Endocrynol. 121, (3), 261-277.

25. Lukyanetz E.A.. Different secretory vesicles can be involved in depolarization-evoked exocytosis. 2001. Biochem.Biophys.Res.Com. 288 (4), p.844-848.

26. Shkryl V.M., Kostyuk P.G., Lukyanetz E.A Dual action of cytosolic calcium on calcium channel activity during hypoxia in hippocampal neurones. 2001 NeuroRep, 12(18), p.4035-4039.

27. Zaika O.L., Pochynyuk O.M., Lukyanetz E.A. 2001. Electrochemical studies of induced secretion of catecholamines from single vesicles of rat chromaffin cells. Ukr. Biochem J. Vol.73(4) pp.69-72

28. Yavorsky V.A., Lukyanetz E.A. 2001. The role of ca ions in frequency accommodation in rat hippocampal neurons. Ukr. Biochem J. Vol.73(5) pp.123-127.

29. Lukyanetz E.A., Shkryl V.M., Kostyuk P.G. Selective blocking of N-type calcium channels by levetiracetam. 2002. Epilepsia. 43(1), p 9-18.

30. Lukyanetz E.A., Pochynyuk O.M., Zaika O.L., 2002. Amperometric evidence about participation of several types of vesicles in exocytosis from chromaffin cells. J. Physiology (Paris), 96, p.147-148.

31. Lukyanetz E.A., Sotkis A.V., Kostyuk P.G. 2002. Mechanisms of up-regulation of single calcium channels by serotonin in Helix pomatia neurons. Biochem.Biophys.Res.Com. 2002 Apr 26;293(1):132-8.

32. Stanika R.I., Kostyuk P.G., Lukyanetz E.A. 2002. Studies of action of hypoxia on calcium homeostasis in sensory neurons of rats. Fiziol Zh. 48(2), p.15-16.

33. Zaika O.L., Pochynyuk O.M., Lukyanetz E.A. 2002. Investigation of calcium transients induced by acetylcholine in isolated chromaffin cells of rat. Fiziol Zh., 48(2), p.5-6.

34. Koval L., Tokar S., Yavorskaya E., Lukyanetz E. (2002) Calcium-induced ultrastructural interactions in adrenocorticocytes. Neurophysiology, 34, No 2/3, 2002, p. 177-178.

35. Lukyanetz I., Yavorskaya E., Tokar S., Lukyanetz E. (2002). Role of mitochondria and endoplasmic reticulum in calcium elevation during Osmotic shock in adrenocortical cells. Neurophysiology, 34, No 2/3, 2002, p. 192-194.

36. Pochynyuk O., Zaika O., Lukyanetz E. (2002) The role of mitochondria in generation of acetylcholine-induced calcium transients in rat chromaffin cells. Neurophysiology, 34, No 2/3, 2002, p. 217-219.

37. Tokar S., Koval L., Yavorskaya E., Lukyanetz E. (2002) Changes in the ultrastructure of adrenocortical cells induced by cholinergic agonists. Neurophysiology, 34, No 2/3, 2002, p. 257-259.

38. Zaika O., Pochynyuk O., Lukyanetz E. (2002) Comparative studies of calcium transients induced by acetylcholine in rat chromaffin cells. Neurophysiology, 34, No 2/3, 2002, p. 270-272.

39. Lukyanetz E. (2002) Vesicular mechanisms of calcium-dependent exocytosis of neurotransmitters. Архив клинической и экспериментальной медицины, т. 11, № 1, 2002, с. 10-14.

40. Kostyuk P., Lukyanetz E., Shuba Y. (2002) Molecular physiology of the calcium channels. Neurophysiology, 34, No 2/3, 2002, p. 117-120.

41. Lukyanetz E.A., Shkryl V.M. Scientific and technological aspects of oxygen-sensitive electrodes for measurements of oxygen partial pressure in patch-clamp experiments. 2003, Biochem. Biophys. Methods. 55(1), p. 37-52.

42. Lukyanetz E.A., Stanika R.I., Koval L.M., Kostyuk P.G. 2003. Intracellular mechanisms of hypoxia-induced calcium increase in rat sensory neurons, Arch.Biochem.Biophys, 410(2), p.212-221.

43. Kostyuk P.G., Stanika R.I., Koval L.M., Lukyanetz E.A. 2003. Intracellular calcium homeostasis of sensory neurons at hypoxic influences. Fiziol. Zh.(Kiev) 49(3), p. 3-10.

44. Lukyanetz E.A., Shkryl V.M., Kravchuk O.V., Kostyuk P.G. Hypoxic effect on calcium channels depends on extracellular calcium in hippocampal neurons. 2003. Br. Res, 980(1), p.128-134.

45. Kostyuk P.G., Pochynyuk O.M., Zaika O.L., Lukyanetz E.A. 2003. Role of nicotinic and muscarinic receptors in calcium signalling and neurotransmitter release. 2003, Neurophysiology, 35, p.229-235.

46. Lukyanetz E.A., Shkryl V.M., Kravchuk O.V., Kostyuk P.G. 2003. Action of hypoxia on different types of calcium channels in hippocampal neurones. BBA, 1618/1 pp. 33-38.

47. Zaika O.L, Pochynyuk O.M., Kostyuk P.G., Lukyanetz E.A. 2004. Acetylcholine-induced calcium signalling in adrenaline and noradrenaline containing adrenal chromaffin cells. ABB 424/1 pp. 23-32.

48. Lukyanetz E.A., Stanika R.I., Koval L.M., Yavorskaya E.N., Kostyuk P.G. 2004. Studies of mechanisms of intracellular calcium oscillations caused by hypoxia in chromaffin cells of rat. Clinical and experimental pathology. 3(2/2), p. 94-96.

49. Tokar S.L., Koval L.M., Yavorska E.M., Lukyanetz E.A., Ultrastructural characteristics of rat adrenal cortex cultured cells in the norm and after calcium ionophore A23187 and adrenocorticotropic hormone application. Fiziol Zh. 2004;50(2):105-10.

50. Ultrastructural characteristics of lipid droplets in rat adrenocortical cells from zona fasciculata-reticularis. Fiziol Zh. 2004;50(6):107-13.

51. Kostyuk P.G., Stanika R.I., Lukyanetz E.A. 2004. Intracellular mechanisms of hypoxic disorders in nerve cell function. In: Problems of hypoxia: molecular, physiological and medical. Lukyanova L.D., Ushakov I.B. Eds. Moskow, Voronezh. “Istoki”, p.84-95.

52. Bacova Z, Benicky J, Lukyanetz E, Lukyanetz I, Strbak V. Different signaling pathways involved in glucose- and cell swelling-induced insulin secretion by rat pancreatic islets in vitro. Cell Physiol Biochem. 2005;16(1-3):59-68.

53. Kostyuk P.G., Veselovsky M.S., Kostyuk O.P., Kravchenko M.O., Lukyanetz E.A., Moskalyuk A.O., Pochynyuk O.M., Fedulova S.A. 2005. Pathways of regulation of synaptic transmission via effects on submicroscopic structure synapses. In: “Fundamental guide of Sciences“, (Biology and sciences about Earth and environmental) Academperiodyka” Kiev, p.119-129.

54. Kostyuk P.G., Kostyuk E.P., Lukyanetz E.A. 2005 Calcium ions – from physiology to pathology. Naukova Dumka, Kiev, pp. 197.

ВИБРАНІ ТЕЗИ ДОПОВІДЕЙ (2000-2005)

1. Lukyanetz E.A. Intracellular components of regulated exocytosis in chromaffin cells. New Jersey, CRDF Meeting, USA 12-19 March, 2000.

2. Lukyanetz E.A. Intracellular events during regulated exocytosis in chromaffin cells. NATO Workshop, Ca²⁺ Signaling and Cross-talk, IlCiocco, Italy 26-30 April, 2000.

3. Lukyanetz E.A., Yavorsky V.A., Kostyuk P.G. Electrical properties of tonic hippocampal neurones can underlie epileptogenesis in brain. 2000. Fiziol Zh. III National congress of Pathophysiologists, 24-27 May, Odessa

4. Lukyanetz E.A. 2000. Ca-dependent exocytosis in neuroendocrine cells, Autumn Workshop "Membranes and Signalling", Kiev, September 4-8, 2000. (lecture, not published)

5. Yavorsky V.A., Lukyanetz E.A. 2000. Influence of Li⁺ ions on properties of accommodation in CA1 hippocampal neurones. Neurophysiology (Kiev). Autumn Workshop "Membranes and Signalling", Kiev, September 4-8, 2000.

6. Zaika O.L., Pochynyuk O.M., Lukyanetz E.A. 2000. Comparative characteristics of secretory responses of chromaffin cells and pheochromocytoma cells (PC12) during their activation by acetylcholine. Neurophysiology (Kiev). Autumn Workshop "Membranes and Signalling", Kiev, September 4-8.

7. Koval L.M., Yavorskaya E.N., Tokar S.L, Lukyanetz E.A. 2000. Ultrastructural properties of steroid vesicles and mitochondria in bovine adrenocortical cells. Neurophysiology (Kiev). Autumn Workshop "Membranes and Signalling", Kiev, September 4-8, 2000.

8. Lukyanetz E.A., Pochynyuk O.M., Zaika O.L. 2000. Amperometric evidence about participation of several types of vesicles in exocytosis from chromaffin cells. Confrence en Neurobiologie Ladislav Tauc 2000, Gif-sur-Yvette, France, December14-15 2000.

9. Lukyanetz E.A., Zaika O.L., Pochynyuk O.M., Kostyuk P.G. 2000. Two classes of vesicles participate in induced exocytosis from isolated rat chromaffin cells. J. Physiol., Physiological Society Meeting, King's College London, UK, December 18-20.

10. Lukyanetz E.A. 2001. Intracellular mechanism of calcium-dependent neurotransmitter release. Bogomoetz-Nencki Meeting, Sulejow, Poland, 2001, p. L4.

11. Lukyanetz E.A. Vesicular mechanisms of calcium-dependent exocytosis of neurotransmitters II Conference of Ukrainian Society for Neurosciences with international participation. Dedicated to 70-aniversary of Physiology Dept. Donetsk State Medical University. Donetsk, 23-27 May 2001

12. Lukyanetz, EA, Pochynyuk, OM, Zaika OM. 2001. Evidence for participation of different types of vesicles in stimulus-induced exocytosis in chromaffin cells. XXXIV International Congress of Physiological Sciences, New Zeland, August 26-31, 2001, IUPS .

13. Lukyanetz E.A., Shkryl V.M., Kostyuk P.G. Antiepileptic drug levetiracetam selectively blocks N-type calcium channels isolated CA1 hippocampal neurons. 2001, Joint Meeting of American Epilepsy Society and the American clinical Neurophysiology Society, Philadelphia, Nov30-.Dec5.

14. Kostyuk P.G., Shkryl V.M., Lukyanetz E.A.. 2002. Analysis of levetiracetam action on calcium channel subtypes of hippocampal neurons. Europ. J. Neurol. 9, (Suppl.2), p. 175. 6^th Congress of the European Federation of Neurological Societies, Vienna, October 26-29, 2002

15. Lukyanetz E.A., Shkryl V.M., Pochynyuk O.M., Zaika O.L., Kostyuk P.G.. 2002. Molecular mechanisms of levetiracetam action on calcium channels in ca1 hippocampal neurons. Europ. J. Neurol. 9, (Suppl.2), p. 178. 6^th Congress of the European Federation of Neurological Societies, Vienna, October 26-29, 2002

16. Lukyanetz E.A. Vesicular mechanisms of calcium-dependent exocytosis of neurotransmitters. 2002. Arch. Clin.Exper.Med. v.11(1), p.10-14. II Conference of Ukrainian Society for Neurosciences. Donetsk.

17. Tokar S., Koval L., Yavorskaya E., Lukyanetz E. Role of calcium ions in ultrastructure changes evoked by adrenocorticotropic hormone in rat adrenocortical cells. 2002. Second Bogomoletz-Nencki Symposium “Intracellular Signalling in Excitable Cells”, Kiev, Ukraine, September 1-3, Abstract Book, p.17.

18. Pochynyuk O., Zaika O., Lukyanetz E. Comparative characteristics of time course of secretion during different type of stimulation from rat chromaffin cells. 2002. Second Bogomoletz-Nencki Symposium “Intracellular Signalling in Excitable Cells”, Kiev, September 1-3, Abs. Book, p.14.

19. Lukyanetz E., Stanika R., Shkryl V., Koval L., Kostyuk P. Hypoxia-induced changes in neuronal activity: role of Ca²⁺ ions and mitochondria. 2002. Second Bogomoletz-Nencki Symposium “Intracellular Signalling in Excitable Cells”, Kiev, Ukraine, September 1-3, Abstract Book, p. 11.

20. Lukyanetz E., Shkryl V., Kostyuk P. Role of external calcium ions in the development of hypoxic response in hippocampal neurons. 2002, Intern. Symp. “ASTROECO-2002”, Abstr Book, p.65.

21. Kostyuk P., Stanika R., Koval L., Lukyanetz E. Intracellular mechanisms of hypoxia-induced changes in calcium homeostasis in neurons. 2002. International Symposium “ASTROECO-2002”, Abstract Book, p.53.

22. Zaika O., Pochynyuk O., Lukyanetz E.A., Comparative studies of calcium transients induced by acetylcholine in rat chromaffin cells. 2002. Neurophysiology, 34(2/3), p.270-272. International Summer Workshop “Pharmacology of Synaptic Transmission in the Nervous System” June, Kiev.

23. Tokar S., Koval L., Yavorskaya E., Lukyanetz E.A., 2002, Neurophysiology, 34(2/3), p.257-259. International Summer Workshop “Pharmacology of Synaptic Transmission in the Nervous System”, 16-18 June, Kiev.

24. Pochynyuk O., Zaika O., Lukyanetz E.A., The role of mitochondria in generation of acetylcholine-induced calcium transients in rat chromaffin cells. 2002, Neurophysiology, 34(2/3), P.217-219. International Summer Workshop “Pharmacology of Synaptic Transmission in the Nervous System”, 16-18 June, Kiev.

25. Lukyanets I., Yavorskaya E., Tokar S., Lukyanetz E. Role of mitochondria and endoplasmic reticulum in calcium elevation during osmotic shock in adrenocortical cells. 2002, Neurophysiology, 34(2/3), P.192-194. International Summer Workshop “Pharmacology of Synaptic Transmission in the Nervous System”, 16-18 June, Kiev.

26. Koval L., Tokar S., Yavorskaya E., Lukyanetz E. Calcium-induced interactions in adrenocorticocytes. 2002, Neurophysiology, 34(2/3), P.177-178. International Summer Workshop “Pharmacology of Synaptic Transmission in the Nervous System”, 16-18 June, Kiev.

27. Kostyuk P., Lukyanetz E., Shuba Y. 2002, Neurophysiology, 34, P.117-120. International Summer Workshop “Pharmacology of Synaptic Transmission in the Nervous System”, 16-18 June, Kiev.

28. Tokar S., Lukyanets I.A., Yavorskaya E., Lukyanetz E.A., Changes of intracellular calcium homeostasis evoked by steroidogenic factors. 2002, Abstract Book , P.17. XVI Congress of Ukrainian Physiological Society. 28-30 May, Vinnitsya.

29. Stanika R., Kostyuk P., Lukyanetz E. Studies of hypoxic effect on calcium homeostasis in sensory neurons of rats. 2002, Abstract Book , P.15. XVI Congress of Ukrainian Physiological Society. 28-30 May, Vinnitsya.

30. Lukyanetz E.A. Ultrastructural mechanisms of steroidogenesis in adrenocortical cells. 2002, Abstract Book, P.10. XVI Congress of Ukrainian Physiological Society. 28-30 May, Vinnitsya.

31. Zaika O., Pochynyuk O., Lukyanetz E.A. Studies of calcium transients induced by acetylcholine in isolated chromaffin cells. 2002, Abstract Book , P.5-6, .XVI Congress of Ukrainian Physiological Society. 28-30 May, Vinnitsya.

32. Lukyanetz E.A., Koval L.M., Tokar S.L., Yavorskaya E.N. 2003. Relationship between changes in cell volume and function during steroidogenesis in adrenocortical cells. Abstract Book , P.51. The First Multilateral Conference of the Physiologists from Central Europe., 5-8 February, Piestany, Slovak Republic.

33. Kostyuk P.G., Pochynyuk O.M., Zaika O.L., Lukyanetz E.A. 2003. Role of nicotinic and muscarinic receptors in calcium signalling and neurotransmitter release. 2003, Neurophysiology, 35(3/4), p.201-207. Second International Symposium „Smooth muscle Physiology and Biophysics“, Kiev, Ukraine

34. Kostyuk P.G., Kostyuk E.P., Pochynyuk O., Zaika O., Potapenko E., Lukyanetz E. 2003. Calcium signalling as the main factor in synaptic transmission – special role of mitochondria. Abstract Book, p.30-34. International Scientific Conference of Serbian Physiological Society “Risk factors and health: from molecule to the scientific basis of prevention” 7-9 Nov. Belgrade, Serbia.

35. Kostyuk P.G., Shkryl V.M., Lukyanetz E.A. Selective blocking of N-type calcium channels of hippocampal neurons by antiepileptic drug levetiracetam. 2003. Proceedings of the 29^th Gottingen Neurobiology Conference and the 5^th Meeting of the German Neuroscience Society. P.294.

36. Lukyanetz E.A., Stanika R.I., Koval L.M., Yavorskaya E.N., Kravchuk O.V., Kostyuk P.G. Hypoxia-induced increase of intracellular calcium concentration in DRG neurons. 2003. Proceedings of the 29^th Gottingen Neurobiology Conference and the 5^th Meeting of the German Neuroscience Society. P.294.

37. Lukyanetz E.A. 2004. Morphological studies of synaptic proteins in vesicular trafficking in chromaffin cells. INTAS Summer Meeting “Control of vesicular trafficking by synaptic proteins neuronal and neuroendocrine cells”, 30^th June, Kiev..

38. Kostyuk P.G., Lukyanetz E.A., Klitgaard H., Margineaanu D-G. Usb 34714 (brivaracetam), a new Pyrrolidone derivate without impact on high-or low-voltage-activated calcium currents in rat isolated neurons. 2004. Epilepsia, v.45, Suppl.7, p.141. Annual Meeting of the American Epilepsy Society, Dec 3-7, New Orlean, USA.

39. Yavorsky V.A., Lukyanetz E.A. Variation of spike generation in isolated hippocampal neurons. 2004. Abstract Book, P.54. IBRO Advanced School of Neuroscience, 16-28 Sept, Yalta, Crimea.

40. Tokar S., Koval L. Yavorskaya E., Lukyanetz E. Features of lipid droplet ultrastructure in rat adrenocortical cells and mechanisms of its regulation. IBRO Advanced School of Neuroscience, 16-28 Sept, Yalta, Crimea. Abstract Book, P.50.

41. Lukyanets I.A., Lukyanetz E.A. 2004. Changes in cell volume induces a growth of intracellular calcium in adrenocortical cells. IBRO Advanced School of Neuroscience, 16-28 Sept, Yalta, Crimea. Abstract Book, P.25.

42. Bacova Z., Benicky J., Lukyanetz E.A., Lukyanets I. Strbak V. 2004. Different signalling pathways for glucose and hypoosmotic induced insulin secretion: role of Ca²⁺ and protein kinase C. IBRO Advanced School of Neuroscience, 16-28 Sept, Yalta, Crimea. Abstract Book, P.2.

43. Lukyanetz E.A., Shkryl V., Stanika R., Koval L., Yavorskaya E. 2004. Influence of hypoxia on Ca²⁺ homeostasis in nerve and endocrine cells. IBRO Advanced School of Neuroscience, 16-28 Sept, Yalta, Crimea. Abstract Book, L.14.

44. Lukyanetz E.A., Pochynyuk O., Zaika O., Koval L., Yavorskaya E., Kostyuk P. Ca²⁺-dependent release of neurotransmitters in neurosecretory cells. IBRO Advanced School of Neuroscience, 16-28 Sept, Yalta, Crimea. Abstract Book, L13.

45. Lukyanetz E.A., Stanika P.I., Koval L.M., Yavorskaya E.N., Kostyuk P.G. 2004. Studies of mechanisms of oscillations in the level of intracellular calcium indiced by hypoxia in chromaffin cells. IV National Congres of Pathophysiologists of Ukraine with International participation. 26-28 May Chernivtsi, Ukraine. Clin.Exp.Pathol. v.3(1), p. 98-100.

46. Stanika R.I., Kostyuk P.G., Lukyanetz E.A. 2004. Cellular mechanisms of changes in calcium concentration in sensory neurons of rats under hypoxic influence. Conference of Young Scientists from Bogomoletz Institute of Physiology “Perspective trends in studies of Modern Physiology”, Kiev. Neurophysiology v.36(1) p.89.

47. Lukyanetz E.A., Pochynyuk O., Zaika O., Koval L., Yavorskaya E., Kostyuk P. 2004. Role of intracellular calcium storing organells and calcium signalling in neurotransmitter release from adrenal chromaffin cells. First (Inaugural) Congress of Ukrainian Society of Cell Biology. 25-28 April, Lviv. Abstract Book, p.302.

48. Lukyanetz E.A., Shkryl V., Kravchuk O., Kostyuk P.G. Calcium mechanisms of excitable cell regulation. 2004. 9-14 February, Tysovets, Ukraine.

49. Lukyanetz EA., Pochynyuk O.M., Zaika O.L., Koval L.M., Yavorskaya E.N., Kostyuk P.G.2004. Difference in neurotransmitter release induced by calcium channel and acetylcholine receptor activation in adrenal chromaffin cells. in “Confrences en Neurobiologie Ladislav Tauc “The world of the synapse: molecular basis, pathology and drug discovery” J.Physiol. (Paris). P32.

50. Kostyuk P.G. Pochynyuk O.M., Zaika O.L., Lukyanetz EA., 2004. Particularities of calcium signalling and its role in neurotransmitter release from adrenal chromaffin cells. in “Confrences en Neurobiologie Ladislav Tauc “The world of the synapse: molecular basis, pathology and drug discovery” J. Physiol. (Paris).P.15.

51. Lukyanetz E.A. 2005. Studies of vesicular trafficking in exocytosis process, joint investigations with German and English scientists. In: Scientific Conference “International collaboration – in the name of peace and development”, 10 Nov., Kiev.

52. Lukyanetz E.A. 2005. Role of intracellular Ca²⁺ in neurotransmitter release in neuroendocrinne cells. I Congress of NIS Physiologists. 19-23 Sept., Sochy, Dagomys, Russia. In: Scientific Proceedings of I Congress of NIS Physiologists. V.1, p.101.