Анотація до роботи:

Коробова О. В. Функціональна роль міоглобіну та карнозину в циклі оксиду азоту за умов гіпоксії. – Рукопис.

Дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата біологічних наук за спеціальністю 03.00.04 – біохімія. Інститут біохімії імені О.В. Палладіна НАН України, Київ, 2004.

Дисертація присвячена дослідженню процесів утворення оксиду азоту (ІІ) в тканинах щурів при гіпоксії за участю міоглобіну та дії гістидинвмісного дипептиду карнозину. Виявлено, що в умовах гіпоксії в тканинах щурів розвивається нітрозативний стрес, інтенсивність протікання якого інгібується карнозином. Введення карнозину запобігає зменшенню гібридизаційного матеріалу кДНК гену міоглобіну з полі-А-РНК в міоцитах скелетних м’язів за умов нітритної інтоксикації різного ступеня важкості. Інтенсивність експресії гену міоглобіну в тканинах у відповідь на гіпоксичний стрес, зменшується в мозку, м’язах та міокарді. Введення карнозину нормалізує цей показник в мозку та міокарді. Нітрозилювання рибонуклеази та її субстрату призводить до зростання відносної швидкості in vitro. Причиною цього можуть бути конформаційні зміни як ферменту, так і субстрату. Про це свідчить гіперхромний ефект у смузі поглинання ароматичних амінокислот РНК-ази та азотистих основ нуклеотидів РНК. Карнозин активує утворення оксиду азоту дезоксиміоглобіном за нітритредуктазним механізмом. Ці дані доповнюють уявлення про здатність карнозину запобігати розвитку необернених критичних станів у міоциті за умов гіпоксичних стресів різного походження та формувати механізм адаптації організму до нестачі кисню.

1. Проведені дослідження дозволили встановити роль дипептиду карнозину в функціонуванні циклу оксиду азоту щодо його здатності прискорювати процеси генерації ендогенного оксиду азоту дезоксиміоглобіном скелетних м’язів.

2. Показано, що за умов гемічної гіпоксії зменшується кількість молекулярних гібридів типу кДНК гену міоглобіну – полі А-РНК міоцитів скелетних м’язів пропорційно до вмісту метгемоглобіну в крові. Карнозин запобігає зменшенню кількості вище зазначених гібридів.

3. Виявлені міжорганні особливості в інтенсивності експресії гену міоглобіну в терміновий період адаптації щурів до гіпоксії: в кардіоміоцитах та міоцитах скелетних м’язів експресія цього гену суттєво пригнічена, а в мозку спостерігається незначне її пригнічення. Введення карнозину нормалізує експресію міоглобінового гену в мозку та міокарді до контрольного рівня.

4. Встановлено, що карнозин, прискорює відновлення нітрит-аніону до оксиду азоту за участю дезоксиміоглобіну, та одночасно гальмує процес нітрозилювання дезоксиміоглобіну в умовах in vitro.

5. Показано, що нітрозилювання РНКази і РНК супроводжується конформаційними змінами ферменту та субстрату, про що свідчить гіперхромний ефект у смузі поглинання ароматичних амінокислот та азотистих основ нуклеотидів. У результаті таких модифікацій збільшується швидкість РНКазної реакції.

6. Виділення продуктів метаболізму NO із сечею має коливний характер в процесі адаптації до тривалої гіпоксії. Максимальні зміни в метаболізмі оксиду азоту виявлено на 18-й та 26-й дні адаптації, при цьому поступово наростає вміст NO₂^-- та NO₃^--аніонів в сечі з кожним наступним максимумом.

7. Досліджувані тканини відрізняються щодо розвитку нітрозативного стресу за умов адаптації до тривалої дії гіпоксії, про що свідчить зростання кількості нітрит-іону у мозку на 23 % та зменшення цього метаболіту в серцевому і скелетному м’язах на 39 і 41 % відповідно.

Публікації автора:

1. Коробова О.В. Вміст мРНК міоглобіну в м’язовій тканині щурів за умов гіпоксичної гіпоксії // Біологія тварин. – 2003. – Т.5, №1-2. – С.140-143.

(Дисертанту належить ідея, покладена в основу статті, виконнання експериментальної частини роботи та написання статті).

2. Коробов В.Н., Сорокина Л.В., Коробова О.В., Дацюк Л.А. Малые дозы рентгеновского излучения активируют NO-синтазную компоненту цикла оксида азота // Радиационная биология. Радиоэкология. – 2003. – Т.43, №2. – С.182-185.

(Дисертант виконала частину експериментальної роботи, брала участь в обговоренні результатів та написанні статті).

3. Ель Ідріссі А., Коробова О.В., Мусіянович Р.Я., Коробов В.М., Новіков В.П. Вплив аргінінопохідного нафтохінону на NO-синтазну систему за умов гіпобаричної гіпоксії // Фармацевтичний журнал. – 2002. – №3. – С.74-78.

(Дисертант брала участь в опрацюванні робочої схеми експерименту, виконанні експериментальних робіт та написанні статті).

4. Korobov V., Sklyarov A., Fedevych Yu., Fedorovych I., Fartushok N., Korobova O. Oxygen-binding qualities of the hemoglobin and contents of NO₂^- in biological liquids in patients with lung cancer // Annales. – 2002. – Vol.15, №13. – Р.327-330.

(Дисертант виконала частину експериментальної роботи).

5. Коробов В.М., Коробова О.В. Вплив гіпоксичної гіпоксії на динаміку синтезу міоглобіну в скелетних м’язах щурів // Вісник Львів. ун-ту. Сер. биол. – 2001. №27. – С.41-46.

(Дисертант є співавтором ідеї, покладеної в основу статті, брала участь у виконанні досліджень та обговоренні результатів).

6. Коробов В.М., Коробова О.В., Великий М.М. Вплив карнозину на вміст міоглобінової м-РНК у скелетних м’язах щурів за умов гемічної гіпоксії // Вісник Львів. ун-ту. Сер. биол. – 2000. – №26. – С.33-38.

(Дисертант брала участь у виконанні досліджень, статистичному опрацюванні даних, оформленні, та написанні статті).

7. Струбицкий И.В., Борисюк М.В., Коробов В.Н., Федорович А.Н., Забабурина М.Л., Коробова О.В. Протекторные свойства карнозина и Zn-карнозина // Первичные фотофизические и фотохимические процессы в биосистемах различных уровней организации. – Воронеж: ВГУ. – 1996. – С.124-126.

(Дисертант приймала участь у виконанні експериментальної роботи).

8. Korobova O. Carnosine alters the ability of deoxymyoglobin to reduce nitrite // 4^th Parnas Conference “Molecular Mechanisms Of Cell Activation: Biological Signals And Their Target Enzymes.” – Wroclaw (Poland). – 2002, 15-17 September. – P.116.

(Дисертанту належить ідея виконання експериментальної роботи, написання, оформлення та переклад тез доповіді).

9. Ель Ідріссі А., Коробова О.В., Мусянович Р.Я., Коробов В.М, Новіков В.П. Синтез аргінінпохідного нафтохінону і його вплив на вміст метаболітів оксиду азоту за умов гіпоксії // IV регіональна конференція молодих вчених та студентів з актуальних питань з хімії. – Дніпропетровськ (Україна). – 2002, 27-31 травня. – С.69.

(Дисертант брала участь у проведенні досліджень, в обговоренні та написанні тез доповіді).

10. Коробов В.Н., Коробова О.В., Дмитренко В.В. Карнозин замедляет деградацию РНК при гипоксическом стрессе // 6-я Пущинская школа-конференция молодых ученых «Биология – наука XXI века». – Пущино (Россия). – 2002, 20-24 мая. – С.98.

(Дисертант брала участь у проведенні досліджень, статистичному опрацюванні даних, оформленні, написанні та перекладі тез доповіді).

11. Коробов В.М., Крисько О.М., Бойко М.М., Коробова О.В., Федорович А.М., Бурда В.А. Роль карнозину у функціонуванні циклу оксиду азоту за умов гемічної гіпоксії // Тези доповідей ІІІ з’їзду Українського біофізичного товариства. Львів (Україна). – 2002, 8-11 жовтня. – С.149.

(Дисертант брала участь у проведенні досліджень, статистичному аналізі та написанні тез доповіді).

12. Коробова О.В., Дмитренко В.В., Коробов В.Н., Кхан Рой М.Э. Карнозин препятствует деградации РНК при гипоксическом стрессе // IV Международная конференция «Биоантиоксидант». – Москва (Россия). – 2002, 16-19 апреля. – С.294-296.

(Дисертант брала участь в експериментальних дослідженнях, статистичному опрацюванні даних, оформленні, написанні та перекладі тез доповіді).

13. Скляров О.Я., Федевич Ю.М., Коробова О.В., Федорович І.П., Коробов В.М. Вплив гаптоглобіну на кисеньзв’язуючі властивості гемоглобіну // Матеріали міжнародної конференції, присвяченої пам’яті професора Шостаківської І.В. – Львів (Україна). – 2002. – С.79.

(Дисертант брала участь у проведенні досліджень, статистичному аналізі та написанні тез доповіді).

14. Біронт Н.В., Коробова О.В., Бойко М.М., Федорович А.М, Климишин Н.І., Коробов В.М., Бурда В.А. Конформаційні зміни гемоглобіну щурів за умов гіпоксії // Ювілейна наукова конференція “Научное наследие академика И.Н. Буланкина и его развитие в современной биохимии”. – Харьков (Украина). – 2001, 16-17 января. – С.17-18.

(Дисертант моделювала гіпоксію та підібрала літературу для написання статті).

15. Коробов В.М., Федорович А.М., Федорович І.П., Федевич Ю.М., Коробова О.В. Модифікації біополімерів оксидом азоту in vitro // Механізми фізіологічних функцій в експерименті та клініці. – Львів (Україна). – 2001. – С.33.

(Дисертант виконала частину експериментальної роботи, брала участь у написанні тез доповіді).

16. Струбицький І.В., Забабуріна М.Л., Зегжда Г.Д., Коробова О.В., Коробов В.М Антиокиснювальні властивості карнозину і його комплексу з цинком // VII Український бiохiмічний з’їзд. – Київ (Україна). – 1997. – С.30-31.

(Дисертант брала участь у виконанні експериментальної роботи та статистичному опрацюванні даних тез доповіді).