11. Волошина Наталія Олексіївна. Диктіокаульоз великої рогатої худоби (поширення, діагностика та лікування): дис... канд. вет. наук: 16.00.11 / Національний аграрний ун- т. - К., 2004.
Анотація до роботи:
Волошина Н.О. Диктіокаульоз великої рогатої худоби (поширення, діагностика та лікування). – Рукопис.
Дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата ветеринарних наук за спеціальністю 16.00.11 – паразитологія, гельмінтологія. Національний аграрний університет, м. Київ, 2004.
Вперше в Україні після реструктуризації сільськогосподарського виробництва досліджено поширення диктіокаульозу великої рогатої худоби. Встановлено, що за період з 1991 р. по 2002 р. кількість інвазованих збудниками диктіокаульозу тварин зросла у 2,6 рази. Проведено скринінгове обстеження 10 господарств в зоні Полісся та Лісостепу (Київська та Житомирська області). Представлені матеріали по розробці та застосуванню методу полімеразної ланцюгової реакції для діагностики диктіокаульозу великої рогатої худоби та створенню на її основі діагностичної тест-системи. Розроблена пара синтетичних олігонуклеотидних праймерів для виявлення ДНК Dyctiocaulus viviparus. Відпрацьовано методи виділення ДНК, умови ампліфікації та підібрані оптимальні концентрації реагентів ПЛР–суміші, що сприяло створенню позитивного контрольного зразка та застосуванню сконструйованої системи праймерів, методики підготовки зразків клінічного матеріалу для діагностування диктіокаульозу. Метод діагностики перевірений на специфічність, чутливість та відтворюваність. Для виявлення личинок диктіокаул у фекаліях, на основі методу полімеразної ланцюгової реакції, створена тест-система "Dyctio-Test". Результати виробничих випробувань стали основою для затвердження нормативної документації на тест-систему в Державному департаменті ветеринарної медицини Міністерства аграрної політики України (ТУУ 24.4.19024865/ 703 - 2003).
Встановлено зміни в морфологічному складі крові великої рогатої худоби, ураженої диктіокаулами. В порівняльному аспекті випробувана ефективність сучасних лікарських засобів широкого спектру дії при диктіокаульозі жуйних тварин.
1. Теоретично та експериментально обґрунтована необхідність розробки та впровадження нового, більш ефективного методу зажиттєвої лабораторної діагностики диктіокаульозу великої рогатої худоби. Запропонована тест-система для виявлення личинок диктіокаул методом полімеразної ланцюгової реакції, узагальнені результати досліджень, що стосуються поширення та лікування диктіокаульозу великої рогатої худоби в поліській та лісостеповій зонах України.
2. Диктіокаульоз великої рогатої худоби - поширена інвазія у тваринницьких господарствах України. Ураженість тварин збудниками диктіокаульозу в ряді господарств Житомирської та Київської областей знаходяться в межах 15,3% - 72,7%, а інтенсивність інвазії - від 2,2 до 7,3 личинок в 1 г фекалій.
3. Вперше в Україні розроблені олігонуклеотидні праймери та відпрацьовані умови роботи з ними. В лабораторних умовах вони виявились придатними для розробки тест-системи для детекції ДНК личинок диктіокаул у фекаліях великої рогатої худоби методом полімеразної ланцюгової реакції.
4. Тест-система "Dyctio-Test" показала високий рівень її специфічності, чутливості та відтворюваності при виявленні ДНК диктіокаул. Порівняння діагностичної ефективності стандартизованого гельмінтоларвоскопічного методу і полімеразної ланцюгової реакції свідчать про перевагу останнього на 30%.
5. На основі проведених досліджень розроблено комплект нормативної документації на тест-систему "Dyctio-Test": ТУУ 24.4.19024865.703 - 2003, настанову по застосуванню ПЛР тест-системи "Dyctio-Test" для виявлення личинок диктіокаул № 15-14 / 269 від 31.07.2003 року та інструкцію по виготовленню і контролю її якості (затверджена Державним департаментом ветеринарної медицини Міністерства аграрної політики України).
6. Високоефективними антгельмінтиками при диктіокаульозі великої рогатої худоби є альбендазол – Л 7,5%, левамізол 10% і нововерм (ЕЕ та ІЕ становила 90% - 100%).
7. Гематологічні дослідження тварин, уражених збудниками диктіокаульозу та через 20 діб після їх дегельмінтизації альбендазолом – Л 7,5%, левамізолом 10% і нововермом показали достовірні зміни в лейкоцитарній формулі (за рахунок зменшення кількості еозинофілів на 19,2% - 40,2%), підвищення кількості еритроцитів (на 3,7% - 18,8%) та вмісту гемоглобіну (на 5% - 13,8%), зменшення вмісту загального білку на 19,3%, що свідчить про звільнення організму тварини від Dictyocaulus viviparus.
Публікації автора:
1. Павленко М.С., Волошина Н.О., Литвиненко О.П., Галат В.Ф. Деякі епізоотологічні аспекти диктіокаульозу великої рогатої худоби в Україні // Науковий вісник Національного аграрного університету. - 2001. – Вип.36. – С.89-91. (У цій статті автор провела дослідження по епізоотології диктіокаульозу).
Методичні рекомендації по організації та проведенню робіт у лабораторіях, які використовують метод полімеразної ланцюгової реакції (ПЛР) / Головко А.М., Дерябін О.М., Троценко З.Р., Кацимон В.В., Волошина Н.О. та інші. – Київ, 2002. - 18с. (Участь дисертанта у написанні рекомендацій).
Волошина Н.О., Кацимон В.В., Галат В.Ф. Сучасні напрямки лабораторної діагностики диктіокаульозу великої рогатої худоби // Тези доп. ХІІ конф. українського наукового товариства паразитологів. – Київ, 2002. – С. 23-24.
Волошина Н.О., Коваленко В.М., Галат В.Ф. Заходи боротьби з диктіокаульозом великої рогатої худоби // Міжвідомчий тематичний науковий збірник. – Харків, 2003. - №82. – С. 126-129. (Автор провела клінічні дослідження з вивчення ефективності протидиктіокаульозних препаратів).
Патент 2003010569. Спосіб діагностики диктіокаульозу великої рогатої худоби / Н.О. Волошина, В.Ф. Галат (Україна). - №60075А; Заявл. 22.01.03. Опубл. 15.09.2003. Бюл.№9. – 2с. (Дисертант особисто підібрала прототипи та аналоги патентованого способу діагностики диктіокаульозу великої рогатої худоби).
6. Волошина Н.О., Галат В.Ф., Замазій А.О. Вивчення впливу антгельмінтиків на стан великої рогатої худоби при ураженні збудниками диктіокаульозу // Збірник наукових праць Луганського Національного аграрного університету / Ветеринарні науки № 31/43. – Луганськ, 2003. – С. 128-130. (Дисертант провела дослідження по вивченню впливу антгельмінтиків на основні показників крові досліджуваних тварин).
7. Волошина Н.О., Галат В.Ф. Вивчення впливу антгельмінтиків на стан великої рогатої худоби при ураженні збудниками диктіокаульозу // Тези доп. ІІ конф. Міжнародної асоціації пазитоцинологів. – Луганськ, 2003. – С. 37.
8. Волошина Н.О. Полімеразна ланцюгова реакція в діагностиці диктіокаульозу великої рогатої худоби // Ветеринарна медицина України, 2003. - №11. - С. 20-21.
9. Волошина Н.О., Галат В.Ф. Ефективність полімеразної ланцюгової реакції при диктіокаульозі великої рогатої худоби // Тези доп. ІІ конф. професорсько-викладацького складу і аспірантів навчально-наукового інституту ветеринарної медицини, якості і безпеки продукції АПК. – Київ, 2003. – С. 56-57.
