Анотація до роботи:

Нечипоренко М.В. Дослідження мутацій та поліморфізмів послідовності ДНК гена фенілаланінгідроксилази в родинах високого ризику фенілкетонурії. -Рукопис.

Дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата біологічних наук за спеціальністю 03.00.26 - молекулярна генетика. - Інститут молекулярної біології і генетики НАН України, Київ, 2002.

Дисертаційна робота присвячена вивченню молекулярно-генетичної природи фенілкетонурії в Україні.

При виконанні роботи проведено аналіз 140 різних мутацій гена ФАГ. Ідентифіковано 11 різних мутацій і встановлено, що мажорною для популяції України є мутація R408W, частота зустрічальності якої в групі хворих на ФКУ становить 57 %. Інші 10 мутацій зустрічаються з частотою від 0,5 до 3,7 %. Встановлено, що мутація R408W зчеплена з мінігаплотипом VNTR03/STR238, що вказує на одноподійне виникнення та балто-слав`янське походження цієї мутації в Україні. Показано асоціацію мажорної мутації R408W з «класичною» формою захворювання. Виявлено модифікуючу взаємодію мутацій різної природи гена ФАГ на формування клінічного фенотипу при розвитку фенілкетонурії.

Розроблено стратегію використання прямого аналізу мутацій гена ФАГ, а також аналізу зчеплення мутантного гена з STR- та VNTR-поліморфними маркерами для пренатальної діагностики фенілкетонурії.

1. Вирішення поставлених в даній роботі завдань дозволило з`ясувати походження, спектр та розповсюдження мутацій гена ФАГ в Україні, а також встановити асоціацію цих мутацій з розвитком клінічних форм фенілкетонурії, що відкриває перспективи для дослідження природи взаємодії конкретних генетичних чинників патогенезу та пошуку нових засобів профілактики цього спадкового захворювання.

2. Вперше у хворих на ФКУ з України проаналізовано 140 мутацій гена ФАГ. Мутантні алелі ідентифіковані на 73-х % ФКУ хромосом і представлені 11-ма різними мутаціями: 9 - міссенс мутацій, 1- нонсенс мутація і 2-і мутації сайтів сплайсингу.

3. Встановлено, що мажорною для популяції України є мутація R408W, частота зустрічальності якої в групі хворих на ФКУ складає 57 %.

4. У результаті сегрегаційного аналізу поліморфних послідовностей ДНК (VNTR і STR) із мажорною мутацією R408W встановлено статистично вірогідну нерівновагу за зчепленням з мінігаплотипом VNTR03/STR238, що свідчить про одноподійне походження цієї мутації в популяції України.

5. Встановлено, що мутація R408W у гомозиготному стані обумовлює розвиток “класичної” форми ФКУ, мутації ж інших типів можуть мати модифікуючий вплив на формування фенотипових ознак даного захворювання.

6. Отримані результати свідчать про високу (93,5%) інформативність використання аналізу мутації R408W і алельних варіантів VNTR-і STR-поліморфізмів для пренатальної ДНК-діагностики фенілкетонурії і масового скринінгу гетерозиготних носіїв цього захворювання в Україні.

7. Вперше створено банк лейкоцитарної ДНК хворих на фенілкетонурію (101 зразок), членів їхніх родин (182 зразки) і осіб, які брали участь у програмі генетичного тестування (175 зразків) з України.

Публікації автора:

1. Dork T., Macek M., Mekus F., Tummler B., Tzountzouris J., Casals T., Krebsova A., Koudova M., Sakmaryova I., Macek M., Vavrova V., Zemkova D., Ginter E., Petrova N.V., Ivaschenko T., Baranov V., Witt M., Pogorzelski A., Bal J., Zekanowsky C., Wagner K., Stuhrmann M., Bauer I., Seydewitz H.H., Neumann T., Jakubiczka S., Kraus C., Thamm B., Nechiporenko M., Livshits L., Mosse N., Tsukerman G., Kadasi L., Ravnik-Glavac M., Glavac D., Comel R., Vouk K., Kucinkas V., Krumina A., Teder M., Kocheva S., Efremov G.D., Onay T., Kirdar B., Malone G., Schwartz M., Zhou Z., Freidman K.J., Carles S., Claustres M., Bozon D., Verligue C., Ferec C., Tzetis M., Kanavakis E., Cuppens H., Bombiery C., Pignatti P.F., Sangiuolo F., Jordanova A., Kusic J., Radojkovic D., Sertic J., Richter D., Rukavina A.S., Bjorck E., Strandvik B., Cardoso H., Montgomery M., Nakielna B., Hughes D., Estivill X., Aznarez I., Tillis E., Tsui L-C., Zielenski J. Characterization of a novel 21-kb deletion, CFTRdele2,3 (21 kb), in the CFTR gene: a cystic fibrosis mutation of Slavic origin common in Central and East Europe // Hum Genet. – 2000. – Vol. 106, N 3. – P. 259-268.

   2. Нечипоренко М.В., Лившиц Л.А. Анализ мутаций гена фенилаланингидроксилазы в семьях высокого риска фенилкетонурии в Украине // Цитология и генетика. –2000.- Т. 34, N 6.-С. 59-63.

   3. Нечипоренко М.В., Кравченко С.А, Лівшиць Л.А. Аналіз мутацій та VNTR-поліморфізму гена фенілаланінгідроксилази //Український біохімічний журнал.- 2001.- Т. 73, N 2.-С. 63-67.

   4. Нечипоренко М.В., Кравченко С.А., Лівшиц Л.А. Молекулярно-генетичний аналіз мутацій та мінігаплотипів гена фенілаланінгідроксилази в Україні // Біополімери і клітина. – 2001. – Т.17, N6. – С. 556-559.

   5. Nechyporenko M.V., Kravchenko S.A., Livshits L.A. PKU in Ukraine: PAH gene mutations and minihaplotype analysis // Bulletin of molecular medicine. –2001.-N 9-10.- P. 1-6.

   6. Нечипоренко М.В., Кравченко С.А., Лившиц Л.А. Анализ мутаций и VNTR-полиморфизма гена фенилаланингидроксилазы //Украинский биохимический журнал.- 2000.- Т. 72, N 2.- С. 141.

   7. Nechyporenko M.V., Kravchenko S.A., Livshits L.A. Mutation and polymorphisms analysis of the phenylalanine hydroxylase gene in high risk PKU families from Ukrane // European Journal of Human Genetics.-2001.- V. 9, supplement 1.-P. 406.

   8. Nechyporenko M.V. Mutations and minihaplotypes analysis of the phenylalaninehydroxylase gene in PKU families from Ukraine // Abstaract of the Conference for students, PhD students and young scientists. – Kyiv (Ukraine).-2001.- P. 154.