Анотація до роботи:

Дімова М. І. Бактеріоциногенні і пробіотичні властивості лактобацил. – Рукопис.

Дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата біологічних наук за спеціальністю 03.00.07 – мікробіологія. – Інститут мікробіології і вірусології ім. Д.К. Заболотного НАН України, Київ, 2007.

Проведено скринінг штамів з бактеріоциноподібною активністю серед 67 культур молочнокислих бактерій. Відібрано Lactobacillus plantarum УКМ B-2705. Дія нативної та сконцентрованої антибактеріальної речовини цього штаму проявлялась по відношенню до представників роду Lactobacillus, а також клінічно значущих умовно-патогенних мікроорганізмів, зокрема, до штамів Enterococcus faecalis, E. faecium, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Proteus vulgaris, Salmonella enterica. Встановлено, що антагоністичний фактор білкової природи, термолабільний, активний в діапазоні рН 2,0-8,0, не кодується плазмідою, його молекулярна маса більше 10 кДа. Отримані дані дозволяють припустити, що антагоністична речовина відноситься до групи ІІ або ІІІ, але не до групи ІV (складні бактеріоцини) і не до групи І (пептиди із розміром до 5 кДа) згідно класифікації бактеріоцинів молочнокислих бактерій. Початок виділення в середовище бактеріоциноподібної речовини зафіксовано в експоненційній фазі росту культури-продуцента, максимальне його накопичення – в стаціонарній.

Культура-продуцент протестована згідно основним вимогам ВООЗ до потенційно пробіотичних штамів. Використання генетичних методів підтвердило приналежність штаму до виду Lactobacillus plantarum. При тестуванні штаму на його чутливість до дії 57 антибіотиків різних груп та різного механізму дії була показана резистентність до 32 з них, зокрема, до аміноглікозидів, фторхінолонів, антифунгальних, деяких пеніцилінів, цефалоспоринів, фузидину, ванкоміцину, поліміксину. Встановлено високоадгезивні властивості мікроорганізма до клітин букального епітелію людини та показана гліколіпідна природа адгезинів. За виявленими антагоністичними та адгезивними властивостями визначено можливість перспективи застосування штама L. plantarum УКМ В-2705 у складі пробіотиків.

Вивчена видова приналежність 67 штамів молочнокислих бактерій, ізольованих з різних природних джерел. Проведено цілеспрямований пошук культур, що проявляють специфічну антимікробну активність.

1. Вперше показано, що більше 90% штамів молочнокислих бактерій, ізольованих з різних природних еконіш, проявляють антагоністичні властивості між близькоспорідненими штамами.

2. Виявлено бактеріоциноподібну активність у штама Lactobacillus plantarum УКМ В-2705, який пригнічував ріст 9 тест-культур, в тому числі представників L. plantarum, L. sp., Leuconostoc mesenteroides subsp. cremoris.

3. Встановлено, що антибактеріальний фактор, який продукується штамом L. plantarum УКМ В-2705, білкової природи, термолабільний, активний в діапазоні рН 2,0-8,0, не проходить через пори діалізних мембран. Бактеріоциногенний фактор не кодується плазмідою і є неіндуцибельним.

4. Показано, що початок виділення бактеріоциноподібної речовини відбувається в експоненційній фазі росту культури, максимальне його накопичення – в стаціонарній.

5. Встановлено активність бактеріоциноподібної речовини по відношенню до умовно-патогенних штамів роду Enterococcus, референс-штамів Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Proteus vulgaris, Salmonella enterica.

6. Виявлена резистентність штаму L. plantarum УКМ В-2705 до антибіотиків: оксациліну, цефепіму, ломефлоксацину, поліміксину, налідиксової кислоти та антифунгальних антибіотиків.

7. Встановлено високоадгезивні властивості бактеріоциногенного штаму L. plantarum УКМ В-2705 на моделі епітеліоцитів людини (середній показник адгезії був в межах 4,6±0,09-5,6±0,08).

8. За виявленими антагоністичними та адгезивними властивостями визначено можливість перспективи застосування штама L. plantarum УКМ В-2705 у складі пробіотиків.

Публікації автора:

1. Дімова М.І., Коваленко Н.К. Вивчення деяких властивостей антагоністичного фактора штаму Lactobacillus plantarum Г 3/3 (13) // Мікроб. журн. – 2006. – 68, №2.- С. 84-91. (Здобувачем знайдено та вивчено властивості бактеріоциноподібної речовини зі штаму Lactobacillus plantarum Г 3/3 (13))

2. Дімова М.І. Пробіотичні властивості бактеріоциногенного штаму Lactobacillus plantarum Г 3/3 (13) // Мікроб. журн. – 2006. – 68, №4.-С. 47-54. (Здобувачем здійснено ідентифікацію бактеріоциногенного штаму, вивчено відношення до антибіотиків та адгезивний процес)

3. Дімова М.І., Коваленко Н.К. Ідентифікація лактобацил із застосуванням систем АРІ 50СН / Науковий вісник Чернівецького університету: Збірник наукових праць. – Вип. 193: Біологія. – Чернівці: «Рута», 2004. – С. 53-57. (Здобувачем здійснено ідентифікацію лактобацил за допомогою стандартизованого тесту на вуглеводи)

4. Дімова М.І., Коваленко Н.К. Бактеріоцини молочнокислих бактерій // Науковий вісник Ужгородського університету. Серія «Біологія». – 2006. - Випуск 18. – С. 109-113. (Здобувачем проведено аналіз літературних даних стосовно питання бактеріоциногенії молочнокислих бактерій)

5. Дімова М.І., Коваленко Н.К. Скринінг та вивчення молочнокислих бактерій, що проявляють бактеріоциноподібну активність // Науковий вісник Чернівецького університету: Збірник наукових праць. – Вип. 297: Біологія. – Чернівці: «Рута», 2006. – С. 94-99. (Здобувачем проведено пошук серед штамів молочнокислих бактерій тих, що проявляють антагоністичну активність)

6. Дімова М.І., Коваленко Н.К. Ідентифікація молочнокислих бактерій із застосуванням систем АРІ 50СН / Х з’їзд товариства мікробіологів України. Тези доповідей. 15-17 вересня 2004 р., Одеса. – Одеса: Астропринт, 2004. – С. 207.

7. Дімова М.І., Коваленко Н.К. Виявлення бактеріоциноподібної активності у молочнокислих бактерій // Молодь і поступ біології: Тези доповідей І Міжнародної конференції студентів та аспірантів (11-14 квітня 2005 р., м.Львів). - Львів: СПОЛОМ, 2005. – С.163-164.

8. Dimova M. I. Screening and study of lactic acid bacteria strains expressed bacteriocin-like activity / EUPROBIO 2005 – European conference on probiotics and their applications. – 6-8 October 2005, Krakow, Poland.

http://confer.uj.edu.pl/euprobio/plakaty/plakat21.pdf

9. Дімова М.І. Адгезія штаму Lactobacillus plantarum Г 3/3 (13) до клітин букального епітелію людини // Молодь та поступ біології: Збірник тез ІІ Міжнародної наукової конференції студентів і аспірантів (21-24 березня 2006 р., м. Львів). - Львів, 2006. – С. 289-290.

10. Димова М. И. Изучение бактериоциногенных и пробиотических свойств штамма Lactobacillus plantarum Г 3/3 (13) // «Биология – наука ХХІ века»: 10-ая Пущинская школа-конференция молодых учёных, посвящённая 50-летию Пущинского Научного Центра РАН (Пущино, 17-21 апреля 2006 г.). Сборник тезисов. – Пущино, Россия, 2006. - С. 188-189.

11. Дімова М. І., Гармашева І. Л., Житкевич Н. В., Яковлева Л. М., Коваленко Н. К. Інгібуюча дія бактеріоциноподібної речовини штаму Lactobacillus plantarum УКМ В-2705 // Молодь та поступ біології: Збірник тез ІІІ Міжнародної наукової конференції студентів і аспірантів (23-27 квітня 2007 р., м. Львів). - Львів, 2007. – С. 344.

12. Димова М. И., Коваленко Н. К. Бактериоциногенные и пробиотические свойства штамма Lactobacillus plantarum УКМ В-2705 / Материалы Международного конгресса "Пробиотики, пребиотики, синбиотики и функциональные продукты питания. Фундаментальные и клинические аспекты" (15-16 мая 2007 года, Санкт-Петербург, Россия) // Клиническое питание. – 2007. - № 1-2. – С. А38.